Rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞。科研人員利用胚胎幹細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治...

問題詳情：

Rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞。科研人員利用胚胎幹細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療，其技術流程如圖（圖中數字序號表示的是相關過程）。請回答下列有關問題：

（1）過程②利用的技術是______________，過程③中涉及到了基因工程技術，其中作為受體細胞的是____________。

（2）過程③中獲取的目的基因是_______________，可以根據該基因的___________________設計引物，利用PCR技術擴增目的基因片段。按此方法和圖示技術流程，完成基Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有____________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。

（3）圖中造血幹細胞中的遺傳物質至少有___________個來源。為檢測Rag2基因的表達情況，可提取治療後小鼠骨髓細胞的蛋白質，用____________進行雜交實驗。圖中所述克隆技術屬於___________克隆。

【回答】

早期胚胎培養    ES細胞    (正常的）Rag2基因    去氧核苷*序列(或鹼基對序列或遺傳信息）    限制*核*內切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶    三    抗Rag2蛋白的抗體    治療*(或體細胞核移植等）   

【解析】

分析題圖：圖示是利用胚胎幹細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療的過程圖解，其中①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養過程，③表示採用基因工程技術將目的基因導入受體細胞。

（1）結合前面的分析可知，過程②利用的技術是早期胚胎培養，過程③中涉及到了基因工程技術，其中作為受體細胞的是ES細胞。

（2）圖示利用胚胎幹細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療，可推知過程③中獲取的目的基因是（正常的）Rag2基因。步驟③中，在構建含有Rag2基因的表達載體時，可以根據Rag2基因的去氧核苷*序列設計引物，利用PCR技術擴增Rag2基因片段。分離、培養ES細胞過程中需要用胰蛋白酶分散細胞。PCR技術擴增過程中用耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），基因導入過程中需要用限制*酶核*內切酶和DNA連接酶。

（3）圖中造血幹細胞中的遺傳物質至少有3個來源：上皮細胞的核基因、卵母細胞的質基因和Rag2基因。為檢測Rag2基因的表達情況，可採用抗原-抗體雜交法，即提取治療後的小鼠骨髓細胞的蛋白質（抗原），用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。根據圖形分析可知：基因導入在體外進行的，因此，該治療方式屬於體外基因治療，圖中所述克隆技術也屬於治療*克隆。

【點睛】本題以基因治療的流程圖為載體，關鍵要能識記細胞核移植和胚胎工程的相關知識；熟悉基因工程中PCR技術、目的基因的獲取、導入、檢測和鑑定等。尤其應注意造血幹細胞中遺傳物質（基因）的來源。

知識點：基因工程

題型：實驗題