利用基因工程技術培育轉基因抗凍番茄，該過程需要用多種限制酶，如圖依次表示EcoRI、SmaI、NaeI三種限制...

問題詳情：

利用基因工程技術培育轉基因抗凍番茄，該過程需要用多種限制酶，如圖依次表示EcoR I、Sma I、Nae I三種限制酶的識別序列及切割位點，

請回答：

（1）上述限制酶在特定位點切割DNA，其實質是斷開DNA分子每條鏈中特定部位的兩個核苷*之間的

_________，切割後產生了_________末端。 （2）利用EcoR I 和Nae I酶切得某種魚的抗凍蛋白基因，可與被EcoR I 和Sam I酶切後的質料連接成重組質料，原因是______________________________________________________。 （3）重組質體導入番茄後，欲檢測抗凍蛋白基因是否轉錄出mRNA，需利用_________作探針。 （4）利用抗凍蛋白製備出相應的_________，然後進行抗原-抗體雜交，觀察到雜交帶出現，尚不足以確定轉基因抗凍番茄培育是否成功。因此，還應將轉基因番茄_________，以確定其耐寒能力是否提高。

（5）應用PCR擴增目的基因時，需要在基因組數據庫中查詢目的基因的_________序列，以便合成引物。PCR過程第一輪循環的模板是____________________________________。

【回答】

（1）**二酯鍵    黏*末端和平末端（答對一個給1分，答對兩個給2分）

（2）相同的黏*末端之間可連接，且不同的平末端之間也可以連接

（3）標記的含有目的基因的DNA片段（或“標記的抗凍蛋白基因”或“標記的含有目的基因的DNA單鏈”）

（4）抗體    置於寒冷環境培養（或進行個體水平檢測或進行抗凍實驗）

（5）核苷*（或去氧核苷*或鹼基）       目的基因的兩條去氧核苷*鏈（或目的基因）

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題