血管內皮生長因子（VEGF）能促進眼部視網膜血管的病理*生長。臨牀上可用VEGF抗體的Fab片段（即抗體的活*...

問題詳情：

血管內皮生長因子（ VEGF）能促進眼部視網膜血管的病理*生長。臨牀上可用VEGF抗體的Fab片段（即抗體的活*片段）作為*物治療視網膜病變。以下是利用大腸桿菌來大量合成該抗體片段的技術路線圖，請回答下列問題：

（1）圖中的質體在基因工程中常作為           ，抗卡那黴素基因和抗四環素基因當作          。其中的核心步驟是         （填圖中標號）

（2）科學家已經測出VEGF的抗體Fab片段的氨基*序列，因此可以通過       方法來獲取目的基因。獲取目的基因後，還需要在其兩端加上限制酶HindⅢ和XhoⅠ識別序列和啟動子T7等序列，T7的位置應該在      （填l、 2 3或4）處。

（3）大腸桿菌常用         處理，使之成為      細胞，以便吸收外源DNA；與重組質體混合培養一段時間後，用分別添加卡那黴素和四環素的培養基進行篩選；如果大腸桿菌在添加卡那黴素的培養基中         ，在添加四環素的培養基中           ，則為需要的目的菌株。

（4）對篩選出的大腸桿菌中目的基因是否成功表達，可以用              技術進行檢測。即用       與提取出的蛋白質雜交來鑑定是否合成抗體Fab片段蛋白。

【回答】

（1）（運）載體      標記基因       ① 

（2）人工合成（化學合成）    2或3 （答“2”或“3”均給分） 

（3）Ca2+ （或CaCl2）    感受態    能生長（或“能形成菌落”）    不能生長（或“不能形成菌落”）

（4）抗原-抗體雜交      血管內皮生長因子（VEGF）

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題