生長激素製劑是治療侏儒症的特效*。利用基因工程讓大腸桿菌合*類的生長激素，部分流程如圖所示（注：Ampr爲氨...

問題詳情：

生長激素製劑是治療侏儒症的特效*。利用基因工程讓大腸桿菌合*類的生長激素，部分流程如圖所示（注：Ampr爲氨苄青黴素抗*基因，Tetr爲四環素抗*基因，Ori是複製原點；EcoRⅠ、BglⅡ、ClaⅠ表示限制酶）。回答下列問題。

（1）EcoRⅠ識別的鹼基序列是GAATTC，該序列中有____________個嘌呤。切割圖中的目的基因時不能選擇EcoRⅠ，理由是____________。

（2）將重組質粒匯入大腸桿菌時，常選用____________處理大腸桿菌，使其成爲感受態細胞。該狀態的細胞具有____________的特*。

（3）利用標記基因篩選含重組質粒的大腸桿菌時，所用培養基中需添加____________（填“氨苄青黴素”或“四環素”），理由是____________。該基因工程所用的大腸桿菌細胞內本身不能攜帶____________基因，否則篩選出的大腸桿菌細胞內不一定有目的基因。

【回答】

6    該酶識別的序列在目的基因中間，會破壞目的基因    Ca2+    易從外界環境吸收DNA    氨苄青黴素    重組質粒中有氨苄青黴素抗*基因，而四環素抗*基因被破壞    氨苄青黴素抗*   

【分析】

基因工程*作的工具是限制*內切酶、DNA連接酶和運載體；基因工程*作的步驟爲提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因匯入受體細胞、目的基因的檢測與表達。目的基因的檢測有多種手段，如①DNA分子雜交技術；②分子雜交技術；③抗原-抗體雜交技術。2、標記基因結構完整，則能在對應培養基中生長。

【詳解】

（1EcoRⅠ識別的鹼基序列應爲含有6個鹼基對的雙鏈DNA片段，根據鹼基互補配對原則，其*有6個嘌呤；圖中生長激素基因是目的基因，而該基因中有EcoRⅠ識別的序列，使用該酶切割會破壞目的基因，故不能選擇EcoRⅠ切割目的基因。

（2）大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是：用Ca2+處理大腸桿菌細胞，改變細胞膜的通透*，使之成爲感受態細胞；該狀態的細胞易從外界環境吸收DNA。

（3）利用標記基因篩選含重組質粒的大腸桿菌時，四環素抗*基因被破壞，而重組質粒中有氨苄青黴素抗*基因，因此，培養基中應添加的抗生素是氨苄青黴素；故爲達到篩選目的，該基因工程所用的大腸桿菌細胞內本身不能攜帶氨苄青黴素基因。

【點睛】

本題考查基因工程的相關知識，解答本題的關鍵是掌握基因工程的原理、*作工具及*作步驟，能正確分析題圖，同時能結合圖中資訊準確答題。

知識點：基因工程

題型：綜合題