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圖1爲三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖.圖中Ap爲氨苄青黴素抗*基因,Tc爲四環素抗*基因,lacZ爲藍...

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問題詳情:

圖1爲三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖.圖中Ap爲氨苄青黴素抗*基因,Tc爲四環素抗*基因,lacZ爲藍*顯*基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等爲限制酶及其切割的位點與複製原點的距離,1Kb=1000個鹼基對長度.請據圖回答:

圖1爲三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖.圖中Ap爲氨苄青黴素抗*基因,Tc爲四環素抗*基因,lacZ爲藍...圖1爲三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖.圖中Ap爲氨苄青黴素抗*基因,Tc爲四環素抗*基因,lacZ爲藍... 第2張

(1)質粒A、C不能作爲目的基因運載體的理由分別是                     、                         .

(2)如果是兩兩重組,可能有    種長度的重組結果.

(3)基因工程中檢測篩選含有目的基因的重組質粒是一個重要的步驟.現運用      酶切質粒,完全酶切後進行電泳觀察,若出現長度爲1.1kb和      kb,或者       kb

和       kb的片段,則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功(重組質粒上目的基因的*入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的鹼基對忽略不計).

(4)將篩選含有目的基因的重組質粒匯入大腸桿菌的載體可以是       (多選).

A.質粒         B.動物病毒        C.噬菌體       D.植物病毒

(5)爲了篩選出成功匯入重組質粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在培養基上培養,得到如圖示2的菌落.再將滅菌絨布按到培養基上,使絨布面沾上菌落,然後將絨布按到含     的培養基上培養,得到如圖3的結果(空圈表示與圖2對照無菌落的位置),挑選目的菌的位置爲                           .

【回答】

解:(1)由圖可知,質粒A中缺少標記基因,質粒C中的複製原點被酶切割,所以A、C不能作爲運載體.

(2)用DNA連接酶連接時,可能出現質粒環化、目的基因環化、形成重組質粒,有3種長度的結果.

(3)根據題意,質粒長度爲2.7kb,目的基因長度爲4.0kb,所以重組質粒長度爲6.7kb,出現長度爲1.1kb,則另一個長度爲5.6kb,若目的基因重組時倒置,可形成3.1kb和3.6kb的片段.

(4)基因工程中常用的運載體有質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒,故匯入大腸桿菌的載體可以是質粒和噬菌體.

(5)爲了篩選出成功匯入重組質粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在培養基上培養,得到如圖乙的1的菌落說明質粒已經匯入.再將滅菌絨布按到培養基上,使絨布面沾上菌落,然後將絨布按到含氨苄青黴素的培養基上培養,得到如圖乙的2的結果,無菌落的位置表示不抗氨苄青黴素,說明爲重組質粒,故挑選目的菌的位置爲圖1培養基中對應圖2中消失的菌落.

故*爲:

(1)缺少標記基因    複製原點被限制酶切割

(2)3

(3)EcoRⅠ5.6       3.1       3.6

(4)A C

(5)氨苄青黴素      圖1培養基中對應圖2中消失的菌落

知識點:生物技術的安全*和倫理問題

題型:填空題

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