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已知新冠病毒为RNA病毒,该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成。现利用单克隆抗体的制备技术来生产...

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已知新冠病毒为RNA病毒,该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成。现利用单克隆抗体的制备技术来生产...

已知新冠病毒为RNA病毒,该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成。现利用单克隆抗体的制备技术来生产预防和诊断新冠病毒的疫苗和抗体。回答下列问题:

(1)新冠病毒合成蛋白A的场所是____。基因工程技术构建的A基因表达载体中启动子能被受体细胞中的____所识别,进而催化A基因的转录。

(2)将制备的A蛋白重复注*到小鼠皮下细胞,目的是获得更多的____细胞。然后将该种细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中,再加入 ___诱导细胞融合。细胞融合后,融合体系中除了含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,还可能含有___。

(3)经细胞融合获得的杂种细胞,还需进行____,才能得到所需的杂交瘤细胞。在将杂交瘤细胞进行扩大培养之前,还需要进行 ___。

(4)在杂交瘤细胞体外培养过程中,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气与5%二氧化碳的混合气体培养箱中进行培养,从氧气和二氧化碳的作用角度分析,这样做的目的是___。

【回答】

宿主细胞的核糖体    RNA聚合酶    浆    聚乙二醇/PEG    骨髓瘤细胞与浆细胞各自自身融合的细胞    选择*培养    抗体检测    氧气是细胞进行有氧呼吸所必需的,二氧化碳用于维持培养液pH相对稳定   

【分析】

基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。

(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。 (2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。 (3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素抗*基因。

单克隆抗体制备流程:先给小鼠注*特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

(1)新冠病毒属于专*寄生的生物,其蛋白质A合成场所是宿主细胞的核糖体上,启动子位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA。

(2)将制备的A蛋白(相当于抗原)重复注*到小鼠皮下细胞,可引起小鼠的特异*免疫,目的是获得更多的能产生抗蛋白质A抗体的浆细胞。将该种细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合。由于细胞融合是随机的,所以细胞融合后,融合体系中除了含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,还可能含有骨髓瘤细胞与浆细胞各自自身融合的细胞。

(3)经细胞融合得到的杂种细胞需要进行选择*培养才可得到杂交瘤细胞,在将杂交瘤细胞进行扩大培养之前,还需要进行抗体检测,获得能产生特异*抗体的杂交瘤细胞。

(4)在杂交瘤细胞体外培养过程中,培养液中的氧气是细胞进行有氧呼吸所必需的,而二氧化碳则用于维持培养液pH相对稳定。

【点睛】

本题考查基因工程、单克隆抗体的制备和动物细胞培养的相关内容,属于教材基础知识的考查,意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系的能力;能运用所学知识,解决生物学问题的能力。

知识点:新冠肺炎

题型:综合题

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