肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导...

问题详情：

肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制，该基因工程技术基本流程如图1，研究发现let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2，请回答下列问题： （1）进行图1过程①时，需用           酶切开载体以*入let-7基因．载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为      ． （2）图1中重组载体导入肺癌细胞的常用方法是            （3）根据图2分析，可从细胞中提取            进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中       含量减少引起的，其实质是遗传信息表达时      过程受阻，导致RAS基因沉默．

【回答】

解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制*核*内切酶（简称限制酶）对载体进行切割，以便于目的基因的*入；启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别和结合的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程． （2）目的基因导入动物细胞中一般采用显微注*法． （3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来检测，从细胞中提取let-7基因的mRNA和用放**同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交．根据题中信息“肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌”知，导入let-7基因后，肺癌细胞的增殖受到抑制，据图2可知，let-7基因影响RAS基因表达的机理是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制． 故*为： （1）限制*核*内切（或限制）    启动子 （2）显微注*法 （3）let-7基因的RNA  （miRNA）            RAS蛋白         翻译

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题