目前基因工程所用的質粒載體主要是以天然細菌質粒的各種元件為基礎重新組建的人工質粒，pBR322質粒是較早構建的...

問題詳情：

目前基因工程所用的質粒載體主要是以天然細菌質粒的各種元件為基礎重新組建的人工質粒，pBR322質粒是較早構建的質粒載體，其主要結構如圖一所示。

(1)構建人工質粒時要有抗*基因，以便於________。

(2)pBR322分子中有單個EcoRⅠ限制酶作用位點，EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—，並只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側各有1個EcoRⅠ的切點，請畫出目的基因兩側被限制酶EcoRⅠ切割後所形成的黏*末端。

(3)pBR322分子中另有單個的BamHⅠ限制酶作用位點，現將經BamHⅠ處理後的質粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連線酶作用恢復________鍵，成功地獲得了重組質粒。說明____________________________________________________。

(4)為了檢測上述重組質粒是否匯入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨苄青黴素的培養基上培養，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養基上，使絨布面沾上菌落，然後將絨布按到含四環素的培養基上培養，得到如圖三的結果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現型是____________，圖三結果顯示，多數大腸桿菌匯入的是________________。

【回答】

 (1)篩選(鑑別目的基因是否匯入受體細胞)

(2)

(3)**二酯　兩種限制酶(BamHⅠ和BglⅡ)切割得到的黏*末端相同

(4)能抗氨苄青黴素，但不能抗四環素　pBR322 質粒

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題