問題詳情:
是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質粒上的唯一酶切位點位於LacZ基因中,如果沒有*入外源基因,LacZ基因便可表達出β-半乳糖苷酶。當培養基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍*,大腸桿菌將形成藍*菌落,反之,則形成白*菌落。如圖表示利用此質粒實施基因工程的主要流程。
請分析並回答:
(1)已獲得的目的基因可利用________技術進行擴增。
(2)目的基因*入質粒構建重組質粒的過程中,需要DNA連線酶恢復________鍵。
(3)將試管Ⅰ中的物質和大腸桿菌共同置於試管Ⅱ的目的是________;大腸桿菌需事先用Ca2+進行處理,目的是____________________________________________。
(4)將試管Ⅱ中的菌液接種於選擇培養基上培養,培養基中應含有大腸桿菌必需的營養物質________________和生長因子,還應加入IPTG、X-gal以及氨苄青黴素,其中加入氨苄青黴素的作用是篩選出______________________________________ 。
(5)若觀察到培養基上出現________*菌落,則說明大腸桿菌中已成功匯入了重組質粒。如果作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則不利於重組質粒的篩選,原因是_______________________________________________________________________。
【回答】
(1)PCR
(2)**二酯
(3)進行轉化 使大腸桿菌細胞處於感受態
(4)碳源、氮源、無機鹽、水 匯入pUC18質粒的大腸桿菌
(5)白 無論大腸桿菌是否匯入重組質粒,均會呈現藍*菌落
知識點:微生物的利用
題型:填空題