基因表達載體的構建是基因工程的核心．圖1爲限制酶EcoRⅠ的識別序列，圖2表示目的基因及限制酶切點，圖3表示目...

問題詳情：

基因表達載體的構建是基因工程的核心．圖1爲限制酶EcoRⅠ的識別序列，圖2表示目的基因及限制酶切點，圖3表示目的基因上的DNA片段，圖4表示質粒．請回答下列問題：

（1）若用圖1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特異*而言，切開的是　                                  之間相連的化學鍵．

（2）圖3爲目的基因中的某一片段，下列有關敘述正確的是　          　．

A．若圖中的ACT能決定一個氨基*，則ACT可稱爲一個密碼子

B．DNA聚合酶和DNA連接酶都可作用於②處，解旋酶作用於①處

C．若只用這個片段中的3個鹼基對，排列出的DNA片段有64種

D．就遊離的**基而言，該片段與重組質粒相比多了2個遊離的**基

（3）若利用PCR技術增加目的基因的數量，由圖2可知，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應選取         作爲引物（DNA複製子鏈的延伸方向5′→3′）．該DNA分子在PCR儀中經過4次循環後會產生等長的目的基因片段　    　個．

（4）爲了使目的基因和質粒定向連接並且有利於受體細胞的篩選，提高重組效率，應該選擇的限制酶是                   　．如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時對質粒進行切割，假設同時只有任意兩個位點被切斷且每次機會相等，則形成含有完整抗四環素基因的DNA片段有　  　種．

（5）如果大腸桿菌是受體細胞，則其體內應不含　       　基因，以利於篩選出含重組質粒的受體菌．目的基因能在大腸桿菌細胞內表達出相同的蛋白質，其遺傳學基礎是　                       　．

【回答】

解：（1）DNA分子的一條多核苷*鏈中，兩個脫氧核苷*之間以**基團和五碳糖相連．由題目可知，EcoRⅠ識別的DNA序列只有G和A，故切開的是鳥嘌呤脫氧核苷*和腺嘌呤脫氧核苷*之間相連的化學鍵．

（2）A、密碼子是mRNA上決定一個氨基*的3個相鄰的鹼基，若圖中的ACT能決定一個氨基*，則其對應的密碼子是UGA，A錯誤；

B、DNA聚合酶和DNA連接酶都可作用於②**二酯鍵處，解旋酶作用中①*鍵處，B正確；

C．A和T之間有2個*鍵，C和G之間有3個*鍵，因此若只用這片段中的3個鹼基對，可以排列出23種片段，C錯誤；

D．就遊離的**基而言，該片段有2個遊離的**基，而重組質粒不含遊離的**基，因此該片段與重組質粒相比多了2個遊離的**基，D正確．

故選：BD．

（3）若利用PCR技術增加目的基因的數量，由圖2可知，DNA複製只能從5’到3’，因此構建前利用PCR技術擴增干擾素基因時，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應選取 B和C 作爲引物，該DNA分子在PCR儀中經過4次循環後會產生基因片段16個，其中等長的目的基因片段8個．

（4）爲了使目的基因和質粒定向連接並且有利於受體細胞的篩選，提高重組效率，四環素抗*基因沒有被破壞，gu8 應該選擇的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ．如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時對質粒進行切割，假設同時只有任意兩個位點被切斷且每次機會相等，若Pst I酶的切割位點用1表示，EcoR I酶的切割位點用2表示，HindⅢ酶的切割位點用3表示，則形成的DNA片段1→2，2→1，2→3，3→2，1→3，3→1六種片段，其中只有2→1片段含有完整四環素抗*基因，即含有完整四環素抗*基因的DNA片段只有1種．

（5）如果大腸桿菌是受體細胞，則其體內應不含 抗四環素基因   基因，以利於篩選出含重組質粒的受體菌．目的基因能在大腸桿菌細胞內表達出相同的蛋白質，其遺傳學基礎是 各種生物共用一套密碼子．

故*爲：

（1）鳥嘌呤脫氧核苷*和腺嘌呤脫氧核苷*

（2）BD 

（3）B和C   8 

（4）PstⅠ、EcoRⅠ1 

（5）抗四環素基因   各種生物共用一套密碼子

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題