肺細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發肺癌．研究人員利用基因工程技術將let-7基因導...

問題詳情：

肺細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發肺癌．研究人員利用基因工程技術將let-7基因導入肺癌細胞實現表達，發現肺癌細胞的增殖受到抑制，該基因工程技術基本流程如圖1，研究發現let-7基因能影響癌基因RAS的表達，其影響機理如圖2，請回答下列問題： （1）進行圖1過程①時，需用           酶切開載體以*入let-7基因．載體應有RNA聚合酶識別和結合的部位，以驅動let-7基因轉錄，該部位稱為      ． （2）圖1中重組載體導入肺癌細胞的常用方法是            （3）根據圖2分析，可從細胞中提取            進行分子雜交，以直接檢測let-7基因是否轉錄．肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由於細胞中       含量減少引起的，其實質是遺傳信息表達時      過程受阻，導致RAS基因沉默．

【回答】

解：（1）過程①表示基因表達載體的構建，在該過程中需要用限制*核*內切酶（簡稱限制酶）對載體進行切割，以便於目的基因的*入；啟動子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別和結合的位點，RNA聚合酶結合到該位點，可驅動轉錄過程． （2）目的基因導入動物細胞中一般採用顯微注*法． （3）判斷目的基因是否在受體細胞中轉錄，可用分子雜交技術來檢測，從細胞中提取let-7基因的mRNA和用放**同位素或者熒光標記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交．根據題中信息“肺細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發肺癌”知，導入let-7基因後，肺癌細胞的增殖受到抑制，據圖2可知，let-7基因影響RAS基因表達的機理是：let-7基因轉錄產物miRNA與RAS基因轉錄產物RAS mRNA結合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細胞中的RAS蛋白含量減少，進而導致癌細胞增殖受到抑制． 故*為： （1）限制*核*內切（或限制）    啟動子 （2）顯微注*法 （3）let-7基因的RNA  （miRNA）            RAS蛋白         翻譯

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題