科學家從某些能無限增殖的細胞質中分離出無限增殖的調控基因(prC)，該基因能激發許多動物細胞*，這為單克隆抗...

問題詳情：

科學家從某些能無限增殖的細胞質中分離出無限增殖的調控基因(prC)，該基因能激發許多動物細胞*，這為單株抗體的製備提供了更為廣闊的前景。請回答以下問題。

(1)利用細胞融合技術製備單株抗體，促進動物細胞融合常用的誘導因素是________________。

(2)利用細胞融合技術製備單株抗體時有兩次篩選，第1次篩選的目的是________________，第2次篩選的目的是_______ 。

(3)有人提出，可以直接通過基因工程導入該調控基因來製備單株抗體，其思路如圖所示。請回答：

①酶A是指________，酶B是指________。

②對已導入重組質體的Ⅱ進行“檢測”的目的是___________ ；題目中Ⅱ所指的細胞是________，Ⅲ所指的細胞具有的特點是__________ 。

③若將目的基因轉入胚胎幹細胞中，胚胎幹細胞也能夠發育成轉基因動物，所依據的生物學原理是________。胚胎幹細胞在體外培養的條件下可以增殖而不發生________，但通過體外定向誘導，能培育出人造________________。

(4)也有人提出用細胞核移植技術構建重組細胞來生產單株抗體，試用相關的圖示及文字表示該過程：

【回答】

【解析】　(1)動物細胞融合的誘導有三種方法：物理方法(如電刺激，振動等)；化學方法(如聚乙二醇)；生物方法(如滅活的病毒)。製備單株抗體，促進動物細胞融合常用的誘導因素是滅活的病毒。

(2)融合時可能出現4種情況，即：①未發生融合的細胞(B淋巴細胞、骨髓瘤細胞)；②自身融合細胞(B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞)；③多細胞融合(多個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合)；④雜交瘤細胞(單個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合而成)。在上述4種情況下，細胞中雜交瘤細胞是製備單株抗體所必需的，因此，用特定的選擇*培養基從不同類型的細胞中篩選出雜交瘤細胞即為第一次篩選。將某種抗原注入小鼠體內後，產生的效應B細胞就會有多種，經過融合後第一次篩選獲得的雜交瘤細胞也就有多種，必須從中篩選出能產生人們所需抗體的特定的雜交瘤細胞，此為第二次篩選。

(3)①讀圖知酶A將目的基因及質體進行了切割即是指限制酶，酶B是表達載體構建時需要的DNA連接酶。

②對導入重組質體的受體細胞進行檢測的目的在於導入的目的基因是否能在受體細胞中表達。因此此工程技術製備的是單株抗體，所以受體細胞應該是漿細胞。Ⅲ所指的細胞既可大量增殖又能產生特異*抗體。

③胚胎幹細胞經過培養髮生了細胞的*、分化最終形成一個完整的生物體，依據的原理是細胞的全能*；胚胎幹細胞在體外培養時通過控制條件可只*而不分化。

(4)細胞核移植技術構建重組細胞來生產單株抗體時，應將可發生大量增殖的細胞(如骨髓瘤細胞)的細胞核去除後利用其細胞質，與被特定抗原刺激後產生的漿細胞的細胞核發生融合重組後，再進行體外培養。

【*】　(1)滅活的病毒　(2)篩選出雜交瘤細胞　篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞　(3)①限制(*核*內切)酶　DNA連接酶

②檢測目的基因在受體細胞中是否進行了表達(或檢測受體細胞是否顯示出目的基因控制的*狀)　漿細胞　既能大量增殖又能產生特定抗體

③細胞的全能*　分化　器官和組織

(4)如圖

知識點：細胞工程

題型：綜合題