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大腸桿菌pUC18質體是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質體上的唯一酶切位點位於LacZ基因中,如果沒有*...

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問題詳情:

大腸桿菌pUC18質體是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質體上的唯一酶切位點位於LacZ基因中,如果沒有*入外源基因,LacZ基因便可表達出β半乳糖苷酶。當培養基中含有IPTG和Xgal時,Xgal便會被β半乳糖苷酶水解成藍*,大腸桿菌將形成藍*菌落。反之,則形成白*菌落。下圖表示利用此質體實施基因工程的主要流程。請分析並回答問題。

大腸桿菌pUC18質體是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質體上的唯一酶切位點位於LacZ基因中,如果沒有*...

(1)對已獲得的目的基因可利用________技術進行擴增。

(2)目的基因*入質體構建重組質體的過程中,需要DNA連接酶恢復________鍵。

(3)將試管Ⅰ中的物質和大腸桿菌共同置於試管Ⅱ的目的是________;大腸桿菌需事先用Ca2+進行處理,目的是________________。

(4)將試管Ⅱ中的菌液接種於選擇培養基上培養,培養基中應含有大腸桿菌必需的營養物質________和生長因子,還應加入IPTG、Xgal以及氨苄青黴素,其中加入氨苄青黴素的作用是篩選出________。

(5)若觀察到培養基上出現________*菌落,則説明大腸桿菌中已成功導入了重組質體。如果作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則不利於重組質體的篩選,原因是__________________________。

【回答】

* (1)PCR

(2)**二酯

(3)進行轉化 使大腸桿菌細胞處於感受態

(4)碳源、氮源、無機鹽、水 導入pUC18質體的大腸桿菌

(5)白 無論大腸桿菌中是否導入重組質體,均會呈現藍*菌落

知識點:細胞工程

題型:填空題

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