(2018山東省實驗中學一模)某質體上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環素...

問題詳情：

(2018山東省實驗中學一模)某質體上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環素基因和抗氨苄青黴素基因。利用此質體獲得轉基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題。

(1)抗鹽基因是否在煙草細胞中穩定遺傳的關鍵是　　　　　　　　　　　　　　　。 

(2)在構建重組質體時,應選用　　　　　　和　　　　　　兩種酶對目的基因和質體進行切割,以保*重組DNA序列的唯一*。 

(3)將目的基因導入植物細胞採用最多的方法是農桿菌轉化法。含有目的基因的農桿菌可根據標記基因進行篩選。若農桿菌在含有氨苄青黴素和四環素的培養基上都可以生長繁殖,農桿菌中是否已含有目的基因?　　　(填“是”或“否”)。為什麼?　　　　　　　　　　　。 

(4)愈傷組織經　　　　　　形成完整植株,這一過程需要再轉接到　　　　　　培養基上進行培養,該過程的實質是　　　　　　　　　　　　。 

【回答】

(1)抗鹽基因(目的基因)是否*入到煙草的染*體DNA上

(2)HindⅢ　SalⅠ

(3)否　含有目的基因的質體抗四環素的基因被破壞

(4)再分化　分化　基因的選擇*表達

解析 (1)抗鹽基因是否在煙草細胞中穩定遺傳的關鍵是抗鹽基因(目的基因)是否*入到煙草的染*體DNA上。(2)只用SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA與質體,形成相同的黏*末端,容易發生自身連接和反向接入,BamHⅠ會破壞目的基因,則在構建重組質體時,應選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對質體和含抗鹽基因的DNA進行切割,以保*重組DNA序列的唯一*。(3)選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對質體進行切割時,形成的重組質體中含抗氨苄青黴基因而抗四環素基因被破壞,故農桿菌中不含有目的基因。(4)愈傷組織經再分化,形成完整植株,這一過程需要再轉接到分化培養基上進行培養,細胞分化的實質是選擇*表達。

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：綜合題