為了有效控制水稻害蟲的危害，*農業科學院和華中農業大學合作，成功地獲得了轉Bt基因的二倍體水稻。該基因來源於...

問題詳情：

為了有效控制水稻害蟲的危害，*農業科學院和華中農業大學合作，成功地獲得了轉Bt基因的二倍體水稻。該基因來源於蘇雲金芽孢桿菌，基因的表達產物Bt毒蛋白具有良好的殺蟲效果。請回答：

（1）若知道Bt毒蛋白的氨基*序列，則可以推測出Bt基因的核苷*序列，但推測出的核苷*序列並不是唯一的，其原因是　   　。在已知Bt基因的核苷*序列之後，再通過　   　方法獲取目的基因。

（2）獲得Bt基因後，在體外可以通過　   　技術進行擴增，該技術需要的條件是　   　、酶、dNTP、模板，其中的酶是　   　。然後構建基因表達載體，基因表達載體中除了具的基因、啟動子和終止子之外，還需具有　   　。

（3）將Bt基因導入水稻細胞中時不宜採用農桿菌轉化法，最可能的原因是　   　。

（4）可採用抗蟲接種實驗的方法，在　   　水平上鑑定Bt基因在受體植株內是否成功表達。

【回答】

（1）密碼子具有簡併*    人工合成

（2）PCR     引物       Taq DNA聚合酶     標記基因和複製原點

（3）水稻是單子葉植物，而農桿菌對單子葉植物沒有感染能力

（4）個體

【分析】基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因*法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注*法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑑定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染*體的DNA是否*入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術。個體水平上的鑑定：抗蟲鑑定、抗病鑑定、活*鑑定等。

【解答】（1）若知道Bt毒蛋白的氨基*序列，則可以推測出Bt基因的核苷*序列，但由於密碼子具有簡併*，因此推測出的核苷*序列並不是唯一的。在已知Bt基因的核苷*序列之後，再通過人工合成

方法獲取目的基因。

（2）體外擴增目的基因可採用PCR技術，該技術需要的條件是引物、酶、dNTP、模板，其中的酶是Taq DNA聚合酶。基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因和複製原點。

（3）將Bt基因導入水稻細胞中時不宜採用農桿菌轉化法，最可能的原因是水稻是單子葉植物，而農桿菌對單子葉植物沒有感染能力。

（4）抗蟲接種實驗屬於個體水平上的鑑定。

【點評】本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及*作步驟，掌握各*作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確答題。

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：綜合題