斑马鱼的酶D由17号染*体上的D基因编码。利用转基因技术将绿*荧光蛋白基因（G）整合到斑马鱼17号染*体上，带...

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斑马鱼的酶D由17号染*体上的D基因编码。利用转基因技术将绿*荧光蛋白基因（G）整合到斑马鱼17号染*体上，带有G基因的胚胎能够发出绿*荧光。具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红*荧光。未整合G基因的染*体的对应位点表示为g。图1和图2所示分别为实验所用的质粒上相关酶切位点以及含绿*荧光蛋白基因（G）的外源DNA片段上具有的相关酶切位点。

（1）将绿*荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染*体上的实验过程中，首先要将G基因与质粒重组，此过程需要的两种工具酶是                                  。

（2）经筛选获得的重组质粒需要经显微注*到斑马鱼的          细胞中加以培养、筛选。如果培养得到的胚胎能                            ，说明G基因已经成功整合到染*体上并且该基因已经得以表达。

（3）用图1中的质粒和图2外源DNA构建重组质粒，不能使用                  切割，原因是                                。如果要防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，则应选择下列方法       为好。

①只使用EcoR I处理         ②使用BamH I和Sma I同时处理

③使用BamH I和Hind III     ④使用Sma I和Hind III同时处理

（4）现用转基因个体N和个体M进行如下杂交实验得到的子代胚胎表现型如图3所示，推测亲代M的基因型是           。

（5）杂交后，出现红·绿荧光（既有红*又有绿*荧光）胚胎的原因是                   ，导致染*体上的基因重组。（提示：哪一亲本在什么生理过程中发生什么行为）

（6）子代中只发出绿*荧光的胚胎基因型包括           （选填选项前的序号，可多选，①DDGG  ②DDGg  ③DdGg  ④DdGG），并画出其染*体上相关基因组成的图解。

【回答】

（1）限制*核*内切酶（限制酶）和DNA连接酶

（2）受精卵（早期胚胎）    发出绿*荧光 

（3）SmaⅠ   SmaⅠ会破坏质粒的抗*基因和外源DNA中的目的基因     ③

（4）Ddgg   

（5）亲代N的初级精（卵）母细胞在减数*过程中，同源染*体的非姐妹染*单体发生了交换

（6）②、③                或           或

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题