科學家嘗試使用Cre/loxP位點特異*重組系統，在檢測目的基因匯入成功後，刪除轉基因菸草細胞內的抗除草劑基因...

問題詳情：

科學家嘗試使用Cre/loxP位點特異*重組系統，在檢測目的基因匯入成功後，刪除轉基因菸草細胞內的抗除草劑基因．其技術過程如下（圖中的■代表基因前的啓動子），據圖回答：

（1）loxP是由34個鹼基對構成的小型DNA片段，有兩個13個鹼基對反向重複序列和中間間隔的8個鹼基對序列組成（如下圖）．對於這種已知序列的小型DNA，通常用        方法獲取．

（2）loxP自身不會表達，*入質粒後也不影響原有基因的表達．Cre酶能特異*地識別此序列並在箭頭處切開loxP上的**二酯鍵，其功能類似於基因工程中的     　酶．從遺傳學角度分析，Cre酶改變質粒產生的結果相當於可遺傳變異中的　      　．

（3）除圖示外，重組質粒中通常還應具有　             　結構；重組質粒上抗除草劑基因的作用是　                         　；將重組質粒匯入到植物細胞中最常用的方法是　            　．

（4）經檢測重組質粒轉導成功後，抗除草劑基因已沒有用途，繼續留在植物體內可能會擴散轉移造成安全問題．經Cre酶處理後，質粒中的兩個loxP序列分別被切開後，可得到如上圖右側的這兩個DNA分子．由於　            　的原因，抗除草劑基因不再表達，之後會在培養過程中消失．

（5）loxP序列是有方向*的．如果經Cre酶處理後，發現抗除草劑基因反向連接在質粒一上，則原來質粒一中這兩個loxP序列的方向是　         　．

A．兩個都是正向B．兩個都是反向C．一個正向一個反向  D．與方向無關．

【回答】

解：（1）基因工程中，對於已知序列的小型DNA，通常用人工（化學）合成方法獲取．

（2）限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷*序列，並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷*之間的**二酯鍵斷裂．Cre酶能特異*地識別此序列並在箭頭處切開loxP，其功能類似於基因工程中的限制酶．從遺傳學角度分析，Cre酶改變質粒產生的結果相當於可遺傳變異中的基因重組．

（3）基因表達載體的組成包括：目的基因、啓動子、終止子、標記基因、複製原點等．重組質粒上抗除草劑基因的作用是作爲標記基因，用於檢測目的基因是否匯入成功；將重組質粒匯入到植物細胞中最常用的方法是農桿菌轉化法．

（4）由於抗除草劑基因前沒有了啓動子的原因，因此抗除草劑基因不再表達，之後會在培養過程中消失．

（5）loxP序列是有方向*的．據圖分析，如果經Cre酶處理後，發現抗除草劑基因反向連接在質粒一上，則原來質粒一中這兩個loxP序列的方向是一個正向一個反向．故選：C．

故*爲：

（1）人工（化學）合成

（2）限制酶　  基因重組　

（3）複製原點、終止子  作爲標記基因，用於檢測目的基因是否匯入成功   農桿菌轉化法　

（4）抗除草劑基因前缺乏啓動子　

（5）C

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題