問題詳情:
圖1為三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖.圖中Ap為氨苄青黴素抗*基因,Tc為四環素抗*基因,lacZ為藍*顯*基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等為限制酶及其切割的位點與複製原點的距離,1Kb=1000個鹼基對長度.請據圖回答:
(1)質粒A、C不能作為目的基因運載體的理由分別是 、 .
(2)如果是兩兩重組,可能有 種長度的重組結果.
(3)基因工程中檢測篩選含有目的基因的重組質粒是一個重要的步驟.現運用 酶切質粒,完全酶切後進行電泳觀察,若出現長度為1.1kb和 kb,或者 kb
和 kb的片段,則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功(重組質粒上目的基因的*入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的鹼基對忽略不計).
(4)將篩選含有目的基因的重組質粒匯入大腸桿菌的載體可以是 (多選).
A.質粒 B.動物病毒 C.噬菌體 D.植物病毒
(5)為了篩選出成功匯入重組質粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在培養基上培養,得到如圖示2的菌落.再將滅菌絨布按到培養基上,使絨布面沾上菌落,然後將絨布按到含 的培養基上培養,得到如圖3的結果(空圈表示與圖2對照無菌落的位置),挑選目的菌的位置為 .
【回答】
解:(1)由圖可知,質粒A中缺少標記基因,質粒C中的複製原點被酶切割,所以A、C不能作為運載體.
(2)用DNA連線酶連線時,可能出現質粒環化、目的基因環化、形成重組質粒,有3種長度的結果.
(3)根據題意,質粒長度為2.7kb,目的基因長度為4.0kb,所以重組質粒長度為6.7kb,出現長度為1.1kb,則另一個長度為5.6kb,若目的基因重組時倒置,可形成3.1kb和3.6kb的片段.
(4)基因工程中常用的運載體有質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒,故匯入大腸桿菌的載體可以是質粒和噬菌體.
(5)為了篩選出成功匯入重組質粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在培養基上培養,得到如圖乙的1的菌落說明質粒已經匯入.再將滅菌絨布按到培養基上,使絨布面沾上菌落,然後將絨布按到含氨苄青黴素的培養基上培養,得到如圖乙的2的結果,無菌落的位置表示不抗氨苄青黴素,說明為重組質粒,故挑選目的菌的位置為圖1培養基中對應圖2中消失的菌落.
故*為:
(1)缺少標記基因 複製原點被限制酶切割
(2)3
(3)EcoRⅠ5.6 3.1 3.6
(4)A C
(5)氨苄青黴素 圖1培養基中對應圖2中消失的菌落
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題