31.（18分）科學家將外源目的基因與大腸桿菌的質體進行重組，並在大腸桿菌中成功表達。下圖表示構建重組質體和篩...

問題詳情：

31.（18分）科學家將外源目的基因與大腸桿菌的質體進行重組，並在大腸桿菌中成功表達。下圖表示構建重組質體和篩選含目的基因的大腸桿菌的過程。請據圖回答問題：

（1）步驟①和②中常用的工具酶是                       和                    。

（2）圖中質體上有抗氨苄青黴素和抗四環素兩個標記基因，經過①和②步驟後，有些質體上的                        基因內*入了外源目的基因，形成重組質體，由於目的基因的分隔使得該抗*基因失活。

（3）步驟③是                                        的過程，為了促進該過程，應該用                   處理大腸桿菌。

（4）步驟④：將三角瓶內的大腸桿菌接種到含四環素的培養基C上培養，目的是篩選

                                 ，能在C中生長的大腸桿菌有        種。

（5）步驟⑤：用無菌牙籤挑取C上的單個菌落，分別接種到D（含氨苄青黴素和四環素）和E（含四環素）兩個培養基的相同位置上，一段時間後，菌落的生長狀況如圖所示。含目的基因的菌落位於          （D、E）上，請在圖中相應的位置上圈出來。

【回答】

31.（18分）

（1）限制*核*內切酶      DNA連接酶

（2）氨苄青黴素抗*基因

（3）將重組質體（目的基因）導入大腸桿菌（受體細胞）     CaCl2溶液

（4）含四環素抗*基因的大腸桿菌（含抗*基因的大腸桿菌給分，但回答含目的基因的大腸桿菌不給分）     2

（5）E

評分標準：在兩個菌落中圈一個也可給2分

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：綜合題