在農業用地中發現一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤．為修復被該除草劑污...

問題詳情：

在農業用地中發現一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物 ）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤．為修復被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細菌（已知該除草劑在水中溶解度一定，該除草劑的培養基不透明）．

（1）製備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行　       　處理．

（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養皿中培養基的特點是：固體培養基且               ．若需要調節培養基pH，應該在各種成分都溶化後且分裝　   　（填“前”或“後”）進行．對培養基進行滅菌，常採用的方法是　            　．

（3）培養後發現，只有很少菌落出現，大部分細菌在此培養基上不能生長的主要原因是　    　或有氧條件抑制了這些細菌的生長．

（4）在固體培養基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是　   　，有透明帶菌落利用的氮源主要是　       　，據此可篩選出目的菌．

（5）若要統計某土壤樣品中該活菌數目，宜採用                　法．

①測定該菌數時，在對應稀釋倍數為106的培養基中，得到以下幾種統計結果，正確可信的是　   　，理由是　                                              　．

A．一個平板，統計的菌落數是230  B．兩個平板，統計的菌落數是220和260，取平均值240

C．三個平板，統計的菌落數分別是210、50和520，取平均值260

D．四個平板，統計的菌落數分別是210、300、240和250，取平均值250

②一同學在稀釋倍數為105的培養基中測得平板上菌落數的平均值為234，那麼每毫升樣品中的菌落數是　      個（塗布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL）．

③用這種方法測定的大腸桿菌菌落數比實際活菌數量   　，因為　                       　．

【回答】

解：（1）製備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．

（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養皿中培養基的特點是：固體培養基且以除草劑作唯一氮源．若需要調節培養基pH，應該在各種成分都溶化後且分裝前進行．對培養基進行滅菌常採用高壓蒸汽滅菌法．

（3）在以該除草劑為唯一氮源的培養基上，不能降解該除草劑的細菌（除具有固氮能力的細菌外）是不能生長的．

（4）根據題中信息“含除草劑的培養基不透明”，則可知無透明帶菌落利用的氮源並不是除草劑，而是來自空氣中的氮氣，有透明帶菌落利用的氮源為除草劑．

（5）接種微生物常用平板劃線法和稀釋塗布平板法，其中稀釋塗布平板法還可用於對微生物進行計數．

①在設計實驗時，一定要塗布至少三個平板，才能增強實驗的説服力與準確*，而且一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數．

②在稀釋倍數為105的培養基中測得平板上菌落數的平均值為234，塗布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL，因此每毫升樣品中的菌落數是234÷0.1×105=2.34×108．

③塗布時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落，這樣使測定的大腸桿菌菌落數比實際活菌數量少．

故*為：

（1）稀釋

（2）以除草劑作唯一氮源　前　高壓蒸汽滅菌

（3）培養基中缺少這些細菌可利用的氮源

（4）氮氣　該除草劑

（5）稀釋塗布平板

①D　在設計實驗時，一定要塗布至少三個平板，才能增強實驗的説服力與準確*；一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數　

②2.34×108　

③少　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落

知識點：微生物的利用

題型：填空題